化妆品检测-防腐挑战试验

防腐挑战试验，又称微生物挑战性试验，是通过人为向化妆品样品中接种特定种类、一定数量的微生物，模拟产品在生产、使用过程中可能遭遇的微生物污染场景，在规定条件下培养后，定期检测样品中存活微生物的数量变化，以此评价产品防腐体系能否有效抑制微生物增殖、保障产品在保质期内安全稳定的试验方法，是化妆品上市前必须完成的关键检测项目，也是企业保障产品质量安全的重要手段。

化妆品检测-防腐挑战试验

防腐挑战试验步骤

菌液制备：分别培养各试验菌株，制备菌悬液，细菌菌悬液浓度调整为10?~10? cfu/mL，真菌(含黑曲霉孢子)菌悬液浓度调整为10?~10? cfu/mL，制备后2h内使用，或2~8℃保存不超过24h(黑曲霉孢子悬液当天使用)。

中和剂鉴定试验：每种菌株单独进行，验证中和剂能有效终止样品中防腐剂的抑菌作用，确保检测结果准确，判定标准为中和后试验组菌落数不低于对照组的50%。

样品接种：无菌条件下，取20~30g(mL)待测样品，加入不超过样品体积1%的菌悬液，用涡旋振荡器混合均匀，每组样品设置平行样及空白对照组(不接种菌液)。

培养与取样：将接种后的样品置于22.5±2.5℃恒温培养箱中保存，分别在接种当天(0天)、第1天、第7天、第14天、第21天、第28天取样检测，每次取样1g(mL)，避免二次污染[4]。

菌落计数：将取样样品用中和肉汤稀释至适宜倍数，接种到对应培养基上，细菌在36±1℃培养48h，真菌在28±2℃培养48~72h，按规范方法计数菌落数，记录数据。

判定标准：第7天时菌落总数下降≥99.9%，第28天时无增长;真菌：第14天时菌落总数下降≥99.0%，第28天时无增长，判定为防腐效果良好;若未达到上述要求，需优化防腐体系后重新试验。